의료기술의 발달과 풍요로운 삶으로 인간의 수명은 길어지고 있으나, 21세기 질환으로 불려지고 있는 치매는 인간의 삶의 질을 동물수준으로 떨어뜨리는 심각한 질병이지만 아직 뚜렷한 예방이나 치료법은 없는 실정이다. 치매를 일으키는 원인물질로는 β-amyloid라는 단백질이 알려져 있는데 뇌에 집적되면 주위에 있는 신경세포가 괴사하게 됨으로 치매가 유발된다. 본 실험에서는 치매항원 단백질을 생산하기 위하여 먼저 β-amyloid 유전자를 두과작물에 알맞게 codon을 최적화하여 설계·합성하고, Gateway system을 이용하여 식물형질전환운반체(pB7WG2D)에 클로닝하였다. A. tumefaciens GV3101에 도입하여 알팔파에 형질전환하였고, 또한 담배엽록체 형질전환운반체인 pLD-ctv에 클로닝하였다. E.coli DH5α에 도입한 후 대량증식시킨 다음 particle bombadiment를 이용하여 담배엽록체에 형질전환하였다. 알팔파 핵에 형질전환된 개체는 phosphinothricin이 함유된 배지에서 선발하여 bar-strip test를 통하여 확인되었다(그림 35). 그리고 담배 엽록체에 형질전환 개체는 spectinomycin을 함유하는 배지에서 선발하여, 잎조직에서 genomic DNA를 분리단 다음 PCR을 함으로 확인하였다(그림 36).
작성일:2010-01-19 14:00:42 152.99.82.30
